У піпетку набирають стільки рідини, щоб вона піднялася на 2-3 см вище за відмітку, потім швидко знімають грушу і закривають верхній отвір піпетки вказівним пальцем правої руки, притримуючи піпетку великим та середнім пальцями.

Найзручніше працювати з піпеткою, що закріплена на штативі. Її заповнюють, зазвичай, за допомогою груші, рідиною до рівня трохи вище за мітку. Потім частину розчину спускають, щоб нижня частина меніска торкнулася мітки на склі. Відміряну рідину зливають у робочу пробірку, колбу тощо.

Використання піпетки вкрай просто, засноване за принципом заповнення вакуумного простору лікарським засобом та вивільненням його за допомогою натискання на гумовий ковпачок. Перед застосуванням піпетку потрібно продезінфікувати кип'ятінням у воді не менше 30 хвилин.